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解決方案
點擊次數(shù):8084 日期:2013/12/5 9:17:02
一、免疫熒光技術簡介
Coons等于1941年首次采用熒光素進行標記而獲得成功。這種以熒光物質(zhì)標記抗體而進行抗原定位的技術稱為熒光抗體技術(fluorescentantibodytechnique)。用熒光抗體示蹤或檢查相應抗原的方法稱熒光抗體法;用已知的熒光抗原標記物示蹤或檢查相應抗體的方法稱熒光抗原法。這兩種方法總稱免疫熒光技術,因為熒光色素不但能與抗體球蛋白結合,用于檢測或定位各種抗原,也可以與其他蛋白質(zhì)結合,用于檢測或定位抗體,但是在實際工作中熒光抗原技術很少應用,所以人們習慣稱為熒光抗體技術,或稱為免疫熒光技術。以熒光抗體方法較常用。[1]用免疫熒光技術顯示和檢查細胞或組織內(nèi)抗原或半抗原物質(zhì)等方法稱為免疫熒光細胞(或組織)化學技術。
二、免疫熒光技術原理
免疫熒光細胞化學是根據(jù)抗原抗體反應的原理,先將已知的抗原或抗體標記上熒光素制成熒光標記物,再用這種熒光抗體(或抗原)作為分子探針檢查細胞或組織內(nèi)的相應抗原(或抗體)。在細胞或組織中形成的抗原抗體復合物上含有熒光素,利用熒光顯微鏡觀察標本,熒光素受激發(fā)光的照射而發(fā)出明亮的熒光(黃綠色或桔紅色),可以看見熒光所在的細胞或組織,從而確定抗原或抗體的性質(zhì)、定位,以及利用定量技術測定含量。
三、免疫熒光技術服務內(nèi)容
收費標準
詢價
服務周期
我公司在接受實驗委托1~3周內(nèi)完成實驗并交付實驗報告。
四、免疫熒光技術服務技術步驟
① 固定:4%多聚甲醛,室溫固定20 min,PBS洗三次,每次3 min;
② 透膜:0.5% Triton X-100 in PBS,室溫10 min,PBS洗三次,每次3 min;
③ 封閉:1%BSA in PBS,室溫30 min,PBS洗一次,3 min;
④ 一抗:按照抗體說明書配制適當比例的一抗,室溫1-2 h或4 ℃過夜,PBS洗三次,每次5 min;
⑤ 二抗:按照抗體說明書配制適當比例的二抗,室溫1-2 h,PBS洗三次,每次5 min;
⑥ 細胞核染色:1 μg/mL DAPI,室溫10 min,PBS洗三次,每次5 min;
⑦ 封片:2-3 μL抗淬滅劑封片。
⑧ 觀察:用熒光顯微鏡觀察結果。
五、如有任何疑問,詳情請電話或 E-mail 咨詢
公司:南京森貝伽生物科技有限公司
電話:025-66915470
傳真: 025-52797049
E-mail:senbeijia@163.com 南京森貝伽生物科技有限公司專業(yè)提供免疫熒光服務,提供全方位,性價比高的解決方案。